高中生物实验总结
高中生物实验总结AdeL生物
实验一 物质鉴定
还原糖 + 斐林试剂=砖红色沉淀（水浴加热）
脂 肪 + 苏丹III =橘黄色（显微镜）
脂 肪 + 苏丹IV=红色（显微镜）
蛋白质 + 双缩脲试剂 =紫色反应
1、还原糖的检测
（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。
（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）
注：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
2、脂肪的检测
（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
（2）步骤：①制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央
②染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）
③制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）
④镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）
3.蛋白质的检测
（1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）
（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)
注;先加A液的目的是使溶液呈碱性
实验二 观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验原理： 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同：甲基绿+DNA→绿色吡罗红+RNA→红色
分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。
实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
几种液体在实验中的作用：
（1）0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形态。
（2）8%的HCl：盐酸能改变细胞膜的通透性，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂的结合
（3）蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。
注：混合染液需要现配现用；该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。
实验三 观察叶绿体和细胞质流动
1、材料：新鲜藓类叶（藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成）、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
步骤：取材→制片→ 低倍观察→ 高倍观察
注:健那绿染液是将活细胞中的线粒体染色的专一性染料线粒体能在健那绿中维持活性数小时。
提示：
（1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？ 表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
（3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？ 进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右。
（4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？
叶脉附近的细胞。
（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？
仍为顺时针。
（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？
否，活细胞的细胞质都是流动的。
（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？
视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。
（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？
叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。
实验四 观察质壁分离和复原
1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡
2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水, 另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论:
细胞外溶液浓度 ＞ 细胞内溶液浓度，细胞失水 质壁分离
细胞外溶液浓度 ＜ 细胞内溶液浓度，细胞吸水 质壁分离复原
实验五 色素的提取和分离
1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2、步骤：（1）提取色素 研磨（二氧化硅和碳酸钙） （2）制备滤纸条
（3）画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次
（4）分离色素：不能让滤液细线触及层析液
（5）观察和记录: 结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄 色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿 色(叶绿素b).
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含量：叶绿素a > 叶绿素b > 叶黄素 >胡萝卜素
二氧化硅：使研磨充分
碳酸钙：防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏
滤液细线为何不能触到层析液：防止色素溶解到层析液中。
实验六 观察有丝分裂
1、材料：洋葱根尖（葱，蒜）
2、步骤：（一）洋葱根尖的培养
（二）装片的制作
制作流程：解离→漂洗→染色→制片
1. 解离: 药液: 质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1 : 1混合液).
时间: 3~5min.目的: 使组织中的细胞相互分离开来.
2. 漂洗: 用清水漂洗约10min.目的:洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3. 染色: 用质量浓度为0.01g / mL或0.02g / mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~ 5min
目的: 使染色体着色,利于观察.
4. 制片: 将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片. 然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:使细胞分散开来,有利于观察.
（三）观察
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1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。
实验七 探究酵母菌的呼吸方式
1、原理: 酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：C6H12O6＋ 6O2＋ 6H2O6→CO2＋ 12H2O ＋ 能量
在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：
C6H12O6→ 2C2H5OH ＋ 2CO2＋ 少量能量
2、装置：
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3、检测：（1）检测CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
（2）检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。
实验八 低温诱导染色体加倍
1、原理：用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。
2、方法步骤：
（1）洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内（4℃），诱导培养36h。
（2）剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。
（3）制作装片：解离→漂洗→染色→制片
（4）观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.
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