高中生物实验必知的试剂,抓紧时间收藏起来!
http://kuailexuexi.net/data/attachment/forum/20240904/1725386619443_0.jpg生物学科必考部分共有19个基础实验,几乎每个实验都涉及多种试剂。
有些不同的试剂中存在同种物质,但可能浓度存在差异;有些不同的试剂成分差异显著,但反应颜色却异常相近;还有一些试剂虽然完全相同,但在不同实验中的作用却截然不同。
一、染色与变色
1.斐林试剂与双缩脲试剂
项目
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
成分
质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
检测物质
还原糖
蛋白质
检测原理
新配制的检测溶液中Cu2+被还原糖中的醛基还原成Cu+,从而生成砖红色的Cu2O沉淀
在碱性环境中Cu2+与肽键反应形成紫色络合物
添加顺序
甲液和乙液等量混匀后立即使用
先加入A液1mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀
反应条件
50 ~ 65 ℃水浴加热
不需加热,摇匀即可
反应现象
样液中出现砖红色沉淀
样液变紫色
2.苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液
苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液将脂肪染色后呈现的颜色均为“红”色系,数字越大,红色越深,脂肪会被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染液染成红色。
3.甲基绿和吡罗红
甲基绿和吡罗红两种试剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。图1表示人的口腔上皮细胞中DNA、RNA分布的状况,图中细胞核呈绿色,细胞质呈红色,可在图中相应区域补充文字以利于记忆。
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4.台盼蓝染液
用台盼蓝染色,死的动物细胞会被染成蓝色,而活的动物细胞不着色,据此可鉴别死细胞和活细胞。
5.健那绿染液
一种将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。图2表示高倍显微镜下的线粒体(已染色),可在图中找到被染成蓝绿色的颗粒,补充相关文字以加深记忆。
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6.溴麝香草酚蓝水溶液
检测CO2。CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄,根据溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测CO2的产生情况。
7.酸性重铬酸钾溶液
鉴定酒精。橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇(俗称酒精)发生化学反应,变成灰绿色。
8.碘液
检测淀粉,淀粉遇碘变蓝。
9.龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)
碱性染料。使染色体着色,用于观察细胞的有丝分裂、减数分裂等。
注意:醋酸洋红液是以醋酸作为溶剂配制的染液,但它是碱性染料(碱性染料是指利用阳离子着色的染料)。
“号外”试剂
高中阶段还有几种在试题中会经常出现的试剂,相关知识如表所示:
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这些试剂的相关知识在全国卷中并非必考的内容,如果在试题中出现,多是选择题,而且是作为干扰选项出现。
二、水解与解离
盐酸的作用整理如下:
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三、制片与制剂
1.制作临时装片是高中实验的一项重要技能,制作方法和注意事项归纳如下:
(1)显微制片时要尽量保持生物材料的天然状态,因此,在制作装片时,总是需要将生物材料置于溶液之中:植物细胞具有细胞壁,将其直接置于清水(或蒸馏水)中即可,动物细胞则需放置于一定浓度的溶液中(如哺乳动物细胞一般用生理盐水,即0.9%的NaCl溶液)。
(2)若在显微观察过程中,要将细胞浸润在某溶液中,需要使用引流法(在盖玻片的一侧滴入溶液,用吸水纸在另一侧吸引,重复几次)。
(3)制片过程中“漂洗”的作用可以分为两个方面:①用于洗去多余染料,使观察结果更加清晰(如观察脂肪细胞中的脂肪颗粒时)。②用于洗去会干扰染色的试剂,避免影响染色效果(如观察根尖分生组织细胞的有丝分裂)。“漂洗”因作用不同,其与“染色”出现的前后顺序有差异,应注意区分。
2.试剂的配制与替代
试剂的配制和替代需要从以下几个角度考虑:
(1)细胞是否需要保持活性
如果实验过程中需要维持细胞活性,就一定要考虑细胞所处环境的渗透压。如果实验材料为动物细胞,则需要使其处在细胞的等渗溶液中。如用健那绿染液使人口腔上皮细胞中线粒体着色的原理是正常活性状态下的线粒体中细胞色素氧化酶能够维持健那绿染液的氧化状态,从而使线粒体呈蓝绿色,所以用生理盐水配制健那绿染液,以保证细胞有活性。
(2)试剂替代性质相似
如叶绿素提取液为有机溶剂,所以不能用水制剂来替代。观察根尖分生组织细胞有丝分裂的实验原理是染色体易被碱性染料染色,所以该实验中可选用颜色较深的碱性染料染色。
(3)试剂浓度
重点试剂的浓度需要准确识记,如斐林试剂乙液为0.05 g/mL的CuSO4溶液,而双缩脲试剂B液为0.01 g/mL的CuSO4溶液;观察植物细胞质壁分离实验选用的蔗糖溶液质量浓度为0.3 g/mL等。
四、提取和分离
教材中与“提取”或“分离”有关的实验有“体验制备细胞膜的方法”与“绿叶中色素的提取和分离”,相关试题易错的原因主要是“相似”内容的干扰,分析如表所示:
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五、冲洗和漂洗
1.酒精在高中生物实验中的作用
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2.与“洗”有关的实验操作
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注意:若被“洗”的物质为水溶性的,则一般选用清水“洗”;若被“洗”的物质是脂溶性的,则一般选用酒精去“洗”。
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