admin 发表于 2024-9-4 04:02:56

高中生物知识点:单克隆抗体

单克隆抗体:

1、抗体:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

2、单克隆抗体的制备

(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞

(2)获得杂交瘤细胞

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合;

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

(3)克隆化培养和抗体检测

(4)将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖

(5)提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠的腹水中提取

3、单克隆抗体的应用

(1)作为诊断试剂,具有准确、高效、简易、快速的优点。

(2)用于治疗疾病和运载药物。

血清抗体与单克隆抗体的比较:

名称

产生

特点

血清抗体

由B淋巴

一般从血清中分离,产量低、纯度低、特异性差

单克隆抗体

由杂交瘤细胞分泌

特异性强,灵敏度高,能大量制备

知识点拨:

1、融合的结果是有很多不符合要求的;如有2个B淋巴细胞融合的细胞等,所以要进行筛选。

2、筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞。

3、杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。

4、单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。

5、单克隆抗体的作用:作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少量用于治疗其它疾病。

知识拓展:

制备单克隆抗体过程中的筛选:筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出B瘤融合的细胞。筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。

相关高中生物知识点:植物体细胞杂交技术

植物体细胞杂交技术:

1、植物体细胞杂交技术:就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

2、过程:

http://kuailexuexi.net/data/attachment/forum/20240904/1725393776521_0.png

(1)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。

(2)细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。

(3)植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株,而不是形成杂种细胞就结束。

(4)杂种植株的特征:具备两种植物的遗传特征,原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

3、意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。

知识点拨:

1、体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管染色体数、基因组数还是染色体组数都采用直接相加的方法。若一植物细胞含有2Ⅳ条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb,另一植物细胞含有2M条染色体,2 个染色体组,其基因型为ccDd,则新植株应为四倍体,其体细胞中染色体数为2N+2M,基因型为AabbccDd。 2、用该过程培育新品种的过程中,遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传定律。只有有性生殖进行减数分裂过程中才符合遗传定律,而体细胞杂交没有此过程。

3、植物体细胞杂交克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。.

知识拓展:

1、植物体细胞杂交包括植物体细胞(原生质体)融合和杂种细胞培育成一个新植株的过程。融合的细胞有多种类型,必须经过筛选,然后才能培育出我们所需要的杂种植株。

2、植物体细胞杂交过程中无有性生殖细胞的结合,属于无性生殖。

3、从杂种植株的染色体组成上看,染色体数目增加,属于染色体数目的变异。

相关高中生物知识点:动物细胞的融合

动物细胞的融合:

1、动物细胞融合:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。

2、诱导方法:化学法(聚乙二醇),灭活的病毒,物理法(离心、振动、电激等)。

3、动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。

动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:

细胞工程

植物体细胞杂交

动物细胞融合

理论基础

细胞的全能性、细胞膜的流动性

细胞增殖、细胞膜的流动性

融合前处理

酶解法去除细胞壁

(纤维素酶、果胶酶)

注射特定抗原,免疫处理正常小鼠

诱导手段

物理法:离心、振动、电激

化学法:聚乙二醇(PEG)

物理法:离心、振动、电激

化学法:聚乙二醇

生物法:灭活的病毒(灭活的仙台病毒)

诱导过程

第一步:原生质体的制备(酶解法)

第二步:原生质体融合(物、化法)

第三步:杂种细胞的筛选和培养

第四步:杂种植株的诱导与鉴定

正常小鼠免疫处理动物细胞的融合

(物、化、生法)杂交瘤细胞的筛

选与培养专一抗体检验阳性细胞培

养单克隆抗体的提纯

用途和意义

克服远缘杂交的不亲和障碍,

大大扩展杂交的亲本组合范围

应用:白菜——甘蓝等杂种植株

(1)制备单克隆抗体

(2)诊断、治疗、预防疾病,例如“生物导弹”治疗癌症

知识点拨:

动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。

知识拓展:

1、在诱导剂的作用下进行细胞的诱导融合,形成的杂种细胞有三种:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂种细胞,所以需要用选择性培养基进行筛选。

2、相比较植物体细胞杂交,动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒处理,其他物理化学诱导融合的方法与植物体细胞杂交过程中原生质体融合方法相同。

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