薄层色谱分析药材提取液成分求助

别春英

实验背景：用乙醇为提取剂，用回流法提取中药秦皮中的香豆素类成分（主要有秦皮甲素和秦皮乙素这两种香豆素类），提取40min后，趁热过滤，药渣再重新加乙醇提取，总共提取两次，第一次用秦皮质量的10倍量乙醇提取，第二次用8倍量提取。
两次得到的提取液分别留样10mL，将这两份样品用水浴法蒸干去除乙醇，再加1~2mL甲醇重溶。（这一步相当于把提取液的溶剂从乙醇换成了甲醇）
将这两份样品和秦皮甲素标准对照品、秦皮乙素对照品一起，用一块G型硅胶板点样，进行薄层色谱分析，展开剂是（三氯甲烷:乙酸乙酯:甲酸）7:3:0.5混合。  秦皮甲素极性大于秦皮乙素
我的疑问是  1.为什么点样前，要将溶剂从乙醇换成甲醇？
2.为什么第一次提取用的乙醇多，第二次用的乙醇少？（个人猜测是第一次提取已经把成分提取的差不多了，剩下的成分少，所以第二次用少点也能提取完，这样可以节约乙醇）
3.我们组的硅胶板结果中，距离原点较远的斑点不如其他组的明显，这是为什么？而且我们组提取液的斑点比其他组少了一组，其他组一列有三个点，我们组缺少了中间的斑点，这又是为什么啊

别春英

ps：如图，图1是我们组的，很抱歉拍的不是很清晰，图2是其他组的。硅胶板中最下面的原点是第一次提取液，最上面的是第二次提取液，中间两个是标准品对照组

别春英

补一张我们组硅胶板结果的示意图

别春英

再补一张两种香豆素的性质，小弟化学基础比较差，不知道我的问题会不会跟性质有关，就贴在这，方便大佬帮忙解决小弟的问题

别春英

关于第三个问题，可能跟我的操作有关，但我不知道具体是什么操作，造成了什么样的影响，我当时对这四个点进行点样，每个点用毛细管加的量都不太一样，而且点样两个标准对照品时加多了，原点有点大（这个应该没什么影响，因为我问题主要出在两次提取液的样点上）。
我当时点两个提取液样点时，毛细管加的量都很少，点到薄层板上时，就不太明显的微微泛点黄的两个毛细管大小的样点，也就是说会不会是点样时，加的样品量太少导致出现这种结果（这个我觉得不太应该，因为两个提取液样点最开始的两个Rf值小的点是清晰的）
再一个，我不知道我点样后，等待样点溶剂挥发这一步骤，等待的时间够不够，溶剂完全挥发没（这个我觉得应该是够的，因为我记得溶剂没挥发主要导致斑点拖尾和扩散，而我的实验结果没出现这两种情况，当然我也不清楚对不对）

别春英

还有第三个问题中，我们组比其他组少一组点这种情况。
第一种可能是其他组的提取液成分确确实实比我们的提取液成分多一种，所以多了一组点（但这种情况不大可能，我们都是用的一样的试剂药材，大致一样的操作）
第二种可能是我们也提取了三种成分，但是由于未知原因导致我们组除了最接近原点的斑点外，另外两个斑点都很淡，尤其是中间的点几乎不可见，而最远的斑点很淡，但是仍可见，这导致从肉眼上来看，我们只有两个点
可是，这两种可能又是什么原因导致的啊

郎冰凡

你拍的图糊成什么样了，没确认的点管它作甚

戊秋柔

1、溶剂置换往往是原因原溶剂在流动相中溶解度不佳、固定相中流动性不佳或产生溶剂效应以至于峰形不佳。
2、多次浸提第二次减少用量确实是因为产品量变少了，但是一般不这样做，一般是三次等量。
3、不明显说明含量比较少，中药产品组分本来就不是很均匀。

巢阳旭

出乙醇副产嘛？